Working Hours Monday - Friday 08:00-16:00
Toll Free 0212345679
 

小葉榕開發現況及運用於促進皮膚修護之化妝品開發

 

(全文刊載在世界中醫藥學會聯合會 健康管理專業委員會第三屆年會 學術論文匯集)
江守訓,楊明蓉,王俊圖,黃禮翼
(1.神易生技開發有限公司;2.臺灣大學化學工程學系博士)

摘要:皮膚修復相關產品,一直都是化妝品中熱銷且重要的項目之一。我們的研究發現有一種台灣本土植物-小葉榕 (F. microcarpa,SIJ-1),其植物萃取物的安全性高 (急毒性 > 10 g/kg),且具有促進傷口癒合的效果,其機制可能在抗發炎及促進皮膚細胞移行。所以將其材料應用於化妝品上,開發與皮膚修復相關之產品。以修護面膜為例,神易生技已進行多項配方之研究,期望經過一些基本測試,如:保水、安定性及試用質感等測試,最後能夠得到一個最佳配方之產品,未來將可利用此植物具有皮膚修護之特性,進行其他相關化妝品之開發。

關鍵字:小葉榕、植物萃取物、皮膚修護、化妝品。

1.前言

植物新藥開發是一條艱辛的道路,神易生技以抗糖尿病潰瘍傷口之植物新藥開發為出發點,依其規劃,持續朝向植物新藥開發的目標前進,並利用現有小葉榕(F. microcarpa,簡稱SIJ-1)之研發成果,研發具有商機之促進皮膚修護化妝品。

皮膚是人體最大的器官,覆蓋全身,它能使體內各種組織和器官免受各式損傷的侵襲。皮膚的修復約可分為下列三個階段:發炎反應、細胞移行和細胞修復,及組織重建。其恢復和修復時間,取決於傷口的面積和深度。因此,神易生技利用具有傷口癒合功效的植物-小葉榕,進行皮膚修護化妝品之開發。

2.小葉榕功效之實驗方法與結果

(1)一氧化氮生成試驗(Nitrite determination)

一氧化氮 (NO)在皮膚傷口癒合的角色,包含毒殺病原物質、促進血管新生、促進表皮細胞及內皮細胞增生等。在傷口癒合初期之發炎階段,可在傷口處偵測到高濃度之citrulline 和 nitrite。同時,在傷口部位的血小板、嗜中性白血球、淋巴球和巨噬細胞,會因受到發炎反應相關細胞激素而釋放出一氧化氮。因此,透過一氧化氮之偵測,可間接評估發炎狀態。方法主要利用一氧化氮在水溶液中會轉化為亞硝酸基nitrite,再利用Griess reagent測定而得。

SIJ-1 抑制一氧化氮生成效果與劑量呈正相關,顯示具有抑制發炎反應效果,IC50濃度為 26μg/ml。

(2)急性毒性測試(Up-and-Down Method)

急性經口毒性試驗是毒理學安全性評價第一階段的最基礎試驗。其目的主要是求出受試物對試驗動物的半數致死劑量( LD50 ),採用 Up-and-Down方法 (OECD Test No. 425: Acute Oral Toxicity : Up-and-Down Procedure)。

試驗結果顯示:以5個SIJ-1口服劑量7.7、8.4、9、9.5、10 g/Kg餵食試驗動物,均未出現死亡現象;最後,再以10 g/kg的劑量餵食4隻試驗動物,亦皆未出現死亡現象。

(3)體外細胞傷口癒合試驗(Cell Wound Healing Assay)

利用細胞移行的測定方法,來計算細胞癒合的能力。以Wound Healing Assay Kit來分析。該方法是在細胞培養盤上預先放置好插槽,鋪上細胞培養並形成單層後移去插槽,形成一個均一的傷口。隨後開始記錄細胞的增殖以及移行現象來分析實驗結果。

SIJ-1 促進表皮細胞移行試驗24小時,以濃度為1.25 μg/ml時效果最佳。

(4)糖尿病動物傷口癒合試驗

主要利用高血糖動物傷口癒合速度較慢,可以明顯看到促進傷口癒合隻效果。試驗利用鏈菌素(Streptozotocin (STZ))進行高血糖之誘導。誘導成功的高血糖動物(300mg/dL)於誘導成功後1-2個月後進行糖尿病傷口癒合試驗。

a.實驗初期傷口並無擴大現象發生。
b.外用藥膏以濃度1.0%時效果最佳,提高劑量並無顯著性差異。

3.有效成分及指標成分分析

先將SIJ-1原料粉末化後,進行不同溶劑萃取比較,發現甲醇萃取物之HPLC圖譜的涵蓋面最大。故將甲醇溶劑萃取後,再分別以不同極性溶液進行分

離萃取,包含粗萃物總計5種分離物,接著進行活性分析,包含抑制一氧化氮生成試驗、抗發炎試驗(抑制IL-6 mRNA生成)及抗菌能力試驗。結果顯示抑制一氧化氮生成及抗發炎主要活性集中於Hex萃取層以及EA萃取層。

以L-M-Hex進行Flash ISCO經Silica gel分離,共獲得125管活性區分物,經TLC確認相似結果合併成10管,編號為L-M-H-I01至L-M-H-I10。經由抑制一氧化氮活性追蹤活性成分,發現主要於L-M-H-I06具有最強的抑制一氧化氮生成活性,且不具有細胞毒性。進一步分離得到純物質L-M-H-I06-P,此純物質為小葉榕的活性成分之一。

針對在己烷層 (L-M-Hex)、乙酸乙酯層 (L-M-EA) 及正丁醇 (L-M-BuOH) 初段分離在HPLC圖譜中於滯留時間15分鐘皆有同一波峰,針對此一波峰進行分離與分析,發現此波峰也存在L-M-H-I08中,將此波峰分離並以NMR進行結構鑑定分析,判斷此物質是β-sitosterol,為小葉榕的指標成分之一。

為達成植物新藥開發之目的,需要進行至少2個指標成分的確認,目前雖然只確認1個化學指標成分、1個活性指標成分,並僅做為化妝品試量產之品管標準,但對於未來開發為植物新藥具有重要的意義。

4.化妝品開發

神易生技利用本藥材具抗發炎、促進表皮細胞生長與傷口癒合等功效,開發化妝品產品,初步已針對大陸型氣候,研發出保濕修護、美白修護等兩種面膜,刻正請學研單位針對產品進行微生物檢測,包含:總菌數(定量)、大腸桿菌(定性)、黃金葡萄球菌(定性)、濃綠桿菌(定性)等,以確保產品安全。同時亦將進行保水、安定性及試用質感等基本測試,期望能夠得到一個最佳配方之產品,未來將可利用此植物具有皮膚修護之特性,進行其他相關化妝品之開發。

致謝

本研究內容感謝嘉義縣政府地方產業創新研發推動計畫(地方型SBIR)及經濟部科技研究發展專案小型企業創新研發計畫補助。同時,亦感謝台灣財團法人生物技術開發中心何士慶博士、賴宗賢博士及高文一博士等人之鼎力推動。

參考文獻

1.江守訓,王俊圖,黃禮翼,一種用於治療傷口癒合的植物萃取物, 臺灣,證書號碼:1491401。
2.江守訓,王俊圖,黃禮翼,一種植物萃取物的備置方法及促進傷口癒合的藥物或傷口包紮物, 中國,專利號:201110252370.0。
3.Chiang Shou-Hsun, MEDICINE CONTAINING EXTRACTS OF FICUS MICROCARPA FOR HEALING WOUNDS OF A DIABETIC PATIENT, USA,20130052289A1
4.TH Lai , WY Kao , SC Ho , TC Wang , SH Chiang , LY Huang , J Chen , CC Lin ,Bioassay guided isolation and identification of anti-inflammatory active components from Ficus microcarpa,Planta Med 2015; 81 - PM_89。
5.江守訓,王俊圖,黃禮翼,小葉榕萃取物促進傷口癒合之應用,第十屆海峽兩岸中醫藥學術交流大會論文,2012.10.26。
6.江守訓,王俊圖,黃禮翼,一種促進傷口癒合之醫藥物,第十一屆海峽中醫藥學術交流大會暨福建中西醫研究學術年會論文,2014.11.08。
7.朱志宏,2007,一種抗炎中藥製劑及其製備工藝,公開號CN 101085038A。
8.周宏兵,2008,一種小葉榕水提物浸膏的焙製方法,公開號CN 101152255A。
9.展學孔,伍曾利,劉全勝,2009,小葉榕提取物、提取方法以及該提取物之應用,公開號CN 101474258A。
10.劉力恆,王立升,王天文,劉雄民,楊曉清,小葉榕化學成分及藥裡活性的研究發展,2008,19(2):390。
11.陳路,王鳴生,王碩,小葉榕不同提取物的主要藥效學研究,2009,廣西植物Guihaia,29(6):871。

 

附件:小葉榕開發現況及運用於促進皮膚修護之化妝品開發.pdf

.

 


台灣中醫藥學會 Taiwan association of chinese medicine
會址:60054嘉義市上海路320巷2號     電話:+886-5-2869665     傳真:+886-5-2869665 E-mail:2869665@gmail.com
台灣中醫藥學會 版權所有 © 翻拷必究 COPYRIGHT 2019 ALL RIGHTS RESERVED|網頁設計 6000